复孔的CT值取平均值再计算ΔCT和ΔΔCT么
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发布时间:2022-05-29 17:05
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时间:2023-10-27 01:15
ct mean,是你相同样品的几个重复的CT值得平均值如果是做的相对定量,用CTmean的结果就可以了,计算方法就是R=2-ΔΔCt,现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因,这个结果也是会有自带软件给计算出来的。如果你是做绝对定量
复孔的CT值取平均值再计算ΔCT和ΔΔCT么
ct mean,是你相同样品的几个重复的CT值得平均值如果是做的相对定量,用CTmean的结果就可以了,计算方法就是R=2-ΔΔCt,现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因,这个结果也是会有自带软件给计算出来的。如果你是做绝对定量
实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
PCR扩增在ABI荧光定量PCR仪中进行,通过设定特定的反应体系和程序,如两步法,来扩增目标序列。统计分析环节,通过获取重复实验的Ct值,计算目标基因与对照基因(如GAPDH)的ΔCt值,再利用2 -ΔΔCt公式,确定实验组相对于对照组的表达变化。
2-△△ct如何进行差异性检验
可以采用以下步骤:1、确认实验目的和研究问题:确定需要比较的实验组和对照组,以及目标基因和参考基因等关键信息。2、进行实验操作和数据收集:按照qPCR实验流程进行样品处理、RNA提取、cDNA合成、荧光定量PCR反应等操作,并记录每个样品的Ct值和反应曲线数据。3、计算ΔCt和ΔΔCt:根据实验数据,计算每个...
用2-△△CT法处理荧光定量PCR数据时,SD值应该怎么算
因为基本每个样本都是三个复孔,所以用目的基因CT平均减去内参的平均,再算其2-△△CT,EXCEL即可。柱状图的error bar是你作图的时候,软件会自动给出,因为你每组会重复三次
设三个复孔一共几个孔
重复做一个样本(3个重复的孔),那只能算一个值(取平均)。我说的1是指的相对表达量,不是ΔCT。你得到每个样本中目的基因和内参的CT值后,就可以算出相对表达量了,这时,取所有对照组的平均值,设为1.每次实验的对照组再和这个平均值1比较,就是对照组的标准差了。5为平均值,那三个组分...
手把手教学——荧光定量PCR全流程实验步骤和注意事项
数据处理: 采用2-ΔΔCt法,借助GraphPad Prism 8.0进行相对定量分析。计算与解释: 比较目的基因与内参基因的Ct值差,得出表达差异倍数,Excel中整理数据,确保每一步都清晰明确。统计分析: 从复孔平均值到t检验,确保数据的正常分布。若方差不齐,需要特殊处理并标记显著性。结果呈现: 生成清晰的图片...
实时荧光绝对定量PCR实验数据分析哪个指标啊?
ct,是从基线到指数增长的拐点所对应的循环次数,仪器中给出的ct就是你每个孔实际的ct值 ct mean,是你相同样品的几个重复的CT值得平均值 如果是做的相对定量,用CTmean的结果就可以了,计算方法就是R=2-ΔΔCt,现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因,这个结果也是会有自带软件给...
如何分析real-time PCR结果
还有对于内参基因的数据,如果所得Ct 值差值在1 以内,是否可以将所有的内参取平均,另外对于这个REAL-TIME PCR 的结果除了用EXCEL 处理之外有没有其他比较可信方便的 内参基因: 18s for control, 18s for treatment sample 目的基因: control sample, treatment sample 复孔取平均值 △ Ct for control ...
实时荧光绝对定量PCR实验数据分析哪个指标啊?
ct,是从基线到指数增长的拐点所对应的循环次数,仪器中给出的ct就是你每个孔实际的ct值 ct mean,是你相同样品的几个重复的CT值得平均值 如果是做的相对定量,用CTmean的结果就可以了,计算方法就是R=2-ΔΔCt,现在很多仪器你只要设置的时候明确标出内参基因和目的基因,这个结果也是会有自带软件给...
q pcr中一个反应做三个复孔是三个生物学重复是否正确
1/10、1/100梯度稀释,每个梯度设置三个复孔,进行qPCR扩增,复孔间CT值取平均值,得到三组CT值。除此之外同学们要注意的是标准曲线绘制及扩增效率计算:可以在excel上进行扩增效率的计算,稀释梯度可以设置为-1/-2/-3,每个梯度对应的CT值分别为23.69/27.04/30.27。