单克隆抗体的克隆化培养方法谁能介绍一下?
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发布时间：2022-05-29 17:04
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时间：2023-10-27 00:02
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细胞丧失产生抗体的能力，所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说，免疫性强的抗原克隆次数可少一些，但至少要3～5次克隆才能稳定。克隆化的方法很多，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。
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单克隆抗体克隆化方法
有限稀释法1. 准备材料：培养盘内预先培养小鼠腹腔细胞，以及HT培养基。操作步骤包括制作细胞悬液、稀释细胞、接种于微量培养盘、在适宜条件下培养并观察克隆生长，选择单个集落，最后将阳性细胞移至有饲养层的组织培养瓶中进行克隆株建立。软琼脂克隆化通过将细胞与琼脂糖混合并接种于软琼脂平板上，细胞会...
单克隆抗体的克隆化方法
（一）有限稀释法1．材料（1）微量培养盘，盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞（即饲养细胞）每孔2万～4万。（2）HT培养基2．操作方法（1）取出抗体阳性孔细胞，用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色，计数。（2）用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。
单克隆抗体的制备步骤
3、选择性培养：选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备：...
单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。（2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能...
单克隆抗体的制备步骤
3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基；4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增；5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法...
单克隆抗体
在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型...
生物导弹是什么?
克隆化方法：经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆...
单克隆抗体的培养中,通过什么技术获得杂交瘤细胞产生的抗体?
1.克隆化的细胞可以在体外进行大量培养，收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。2.体内杂交瘤细胞繁殖，如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小鼠（无胸腺的裸鼠）。待杂交瘤细胞增殖至小鼠死亡后，从其腹水或血清中提取。效价往往高于培养细胞上清液的100~1000倍。
单克隆抗体制备过程
在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞需进一步筛选和克隆化，通过有限稀释法选择能产生特定单克隆抗体的细胞，并进行扩增和鉴定。免疫球蛋白类型、亚类等特性确认后，进行冻存保存。最后，大规模生产单克隆抗体采用两种方法：体内诱生法和体外培养法。体内诱生法中，将杂交瘤细胞植入小鼠腹腔，通过腹水收集抗体。
简述单克隆抗体的发展历程、原理及应用是?
即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法，便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体，其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的，而且在培养过程中，只要没有变异，不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。以上内容参考：百度百科-单克隆抗体 ...
