细胞破碎的方法有哪些
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发布时间:2022-05-10 14:20
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热心网友
时间:2023-10-11 13:47
(1)酸碱处理:调节pH值,改变蛋白质的荷电性质,提高产物的溶解度。 (2)化学试剂处理:用表面活性剂或有机溶剂(甲苯)处理细胞,增大细胞壁的通透性,降低胞内产物的相互作用,使之容易释放。 (3)酶溶:利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞,使细胞壁受到部分或完全破坏后,再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜,进一步增大胞内产物的通透性。 酶溶的优点:操作温和,选择性强,酶能快速地破坏细胞壁,而不影响细胞内含物的质量,但缺点是酶的费用高,因而*了它在大规模生产中的应用。 化学渗透法与机械破碎法相比:速度低,效率差,且化学或生化试剂的添加形成新的污染,给进一步的分离纯化增添麻烦。但化学渗透法选择性高,胞内产物的总释放率低,可有效抑制核酸的释放,料液粘度小,有利于后处理。
热心网友
时间:2023-10-11 13:47
博凌科为解答:1、高速组织捣碎
:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种
子等。2、玻璃匀浆器匀浆
:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。3、超声波处理法
:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在
1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。4、反复冻融法:
将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。5、化学处理法:
有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸
(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活
力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
常用细胞破碎的方法有那些?各有什么优缺点
4、反复冻融法: 将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。5、化学处理法: 有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。无论用哪一种方...
2、简述主要的破碎方法有哪些?
细胞的破碎方法可分为:机械法,包括(1)捣碎法(2)研磨法(3)匀浆法 物理法,包括(1)反复冻融法(2)超声波处理法(3)压榨法 化学与生物化学方法,包括(1)酶解法(2)化学法 目的意义:除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶之外,对于细胞内或多细胞生物组织中的...
实验室常用哪些细胞破碎方法?
(3)超声法:将细胞放置于超声破碎仪中,以一定频率的超声破碎细胞,适用于绝大部分微生物细胞。(4)渗透压法:将血细胞等细胞膜较为薄弱的细胞放置于纯水等低渗溶液,细胞吸收大量水分破解。(5)液氮法:植物细胞一般采用液氮捻磨的方法破解细胞。化学法:(1)强酸、强碱溶液:一般应用0.5N NaOH溶...
试述细胞破碎的方法及各有什么用途。
(1)机械方法指通过机械切力作用使组织破碎的方法:①匀浆法常使用于机体软组织;②组织搅碎机方法常使用于动物韧性组织;③研磨常使用于细菌、酵母。(2)物理方法指通过各种物理因素使组织细胞破碎的方法:①超声波常使用于细胞混悬液;②反复冻融法常使用于培养细胞;③冷热交替法常使用于细菌、病毒;④...
细胞破碎技术非机械法
细胞破碎技术,除了机械法,还有多种非机械方法可供选择。首先,温和的渗透压冲击破碎法利用高渗透压溶液(如甘油或蔗糖)使细胞失水收缩,随后通过快速稀释或转移至低渗透环境,细胞因渗透压骤降而破裂。冻融破碎法则是将细胞置于低温冷冻,随后在室温中融化,细胞膜的疏水键结构受损,胞内水形成冰晶导致膨胀...
产生细胞膜悬液,细胞破碎技术有哪些?总结原理和优缺点。
玻璃珠磨碎 原理:用玻璃珠的搅动来磨碎细胞。优点:对于很难破碎的细胞(如酵母)非常有用。缺点:有些慢且有噪音。渗透压 原理:从高渗透压转向低渗透压介质。优点:操作简便,花费低廉。缺点:仅用于外壁较脆弱的细胞(如动物细胞)。反复冻融 原理:通过反复形成冰晶破碎细胞;通常结合酶法裂解下...
我想知道细胞破碎的方法及各种方法的原理和优缺点?
机械法:主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。
常用的机械式细胞破碎法主要有
常用的机械式细胞破碎法主要有高压匀浆法。高压匀浆法是大规模细胞破碎的常用方法,所用设备为高压匀浆器,是一种很常用的高压匀浆器。高压匀浆法是利用高压使细胞悬浮液通过针形阀,由于突然减压和高速撞击碰撞环而使细胞破裂。从高压室(几十兆帕)压出的细胞悬浮液经过阀座3的中心孔道,从阀座3和阀杆5...
适合小量细胞破碎的方法是
超声破碎法,玻璃珠研磨法。1、超声破碎法:利用超声波的能量在液体中产生空化作用,从而使细胞破碎,该方法适用于小量细胞的破碎,且操作简单、快速。2、玻璃珠研磨法:将细胞与玻璃珠一起置于离心管中,通过剧烈摇晃或搅拌使细胞破碎,这种方法常用于小量细胞的破碎,但需要注意操作过程中的安全性。
细胞破碎的方法有哪些
(1)酸碱处理:调节pH值,改变蛋白质的荷电性质,提高产物的溶解度。 (2)化学试剂处理:用表面活性剂或有机溶剂(甲苯)处理细胞,增大细胞壁的通透性,降低胞内产物的相互作用,使之容易释放。 (3)酶溶:利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞,使细胞壁受到部分或完全破坏后,再利用渗透压冲击等方法...