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发布时间：2024-10-20 12:02
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时间：2024-11-11 17:28
在重组蛋白的表达过程中，包涵体的形成可能源于多种原因，包括:
过量表达：研究发现，随着表达量的增加，包涵体的形成概率也随之增高。这可能是因为合成速度过快，导致蛋白质没有足够时间完成折叠，二硫键配对不准确，或者过多的蛋白质非特异性结合，降低了溶解度。
氨基酸组成：含有较多硫氨基酸的蛋白质更易形成包涵体，而脯氨酸含量的增加则与包涵体形成呈正相关。
环境因素：如发酵温度过高或pH接近蛋白等电点时，包涵体的形成概率增大。此外，大肠杆菌作为异源蛋白宿主，由于缺乏真核生物的翻译后修饰，使得中间产物积累，易形成包涵体。
在基因工程之前，天然蛋白质的外源表达也会形成包涵体，如内酰氨酶和碱性磷酸酶在大肠杆菌中的过量表达。包涵体的形成还受温度影响，高温可能导致蛋白质变性并聚集。然而，一些具有高稳定性的蛋白质，如P22尾刺蛋白，虽然在细胞内形成包涵体，但其折叠和稳定性与温度密切相关。
此外，添加糖类如蔗糖可以改善内酰胺酶包涵体的形成，通过稳定蛋白质结构或防止折叠中间体聚集。生长添加剂如乙醇、巯基化合物和NaCl也有助于提高蛋白质的可溶性表达。包涵体的形成是一个普遍现象，与蛋白质序列、表达速度、伴侣分子和生长环境密切相关。
包涵体即表达外源基因的宿主细胞，可以是原核细胞，如大肠杆菌；也可以是真核细胞，如酵母细胞、哺乳动物细胞等。包涵体是病毒在增殖的过程中，常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构，在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定形。一般是由完整的病毒颗粒或尚未装配的病毒亚基聚集而成；少数则是宿主细胞对病毒感染的反应产物，不含病毒粒子。
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