VCaP细胞培养注意事项
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发布时间:2024-10-21 04:07
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时间:2024-10-21 07:44
VCaP(人前列腺癌细胞)是一种生长特性为贴壁的细胞,其培养条件需采用DMEM培养基添加10% FBS和1% P/S,培养环境应保持在37℃、5% CO2的条件下,且保持饱和湿度。这种细胞源自一位59岁男性前列腺癌患者的脊椎转移灶,对雄性激素敏感,并且产生Bxv-1小鼠异种逆转录病毒。
在进行VCaP细胞培养时,需要注意以下几点:
1. 细胞附着过程较慢:解冻和继代后,可能需要48小时才能完全贴壁。在接种后,应耐心等待,不要急于观察。
2. 生长速度较慢:细胞融合需要2周或更长时间,且可能伴有粘附细胞、漂浮簇和碎片。接种时应保持适当的密度,推荐1:2的传代比例。
3. 漂浮细胞处理:在更换培养液或传代过程中,遇到漂浮细胞应收集并重新接种,避免浪费。
4. 黑点现象:背景中可能出现黑点,多为细胞代谢产物和碎片,不影响生长,可通过预热PBS轻柔清洗处理。