Tm值的影响Tm值的因素
(G—C)%=(Tm-69.3)×2.44 在一定条件下(pH7.0,0.165MNaCl中)Tm值与(GC)%含量呈正比关系。因此,通过测定Tm值,可以推算出DNA分子中的碱基百分组成。(2)DNA所处的溶液条件:DNA溶液中离子强度低时,Tm较低,而且熔解温度范围较宽;离子强度较高时,Tm较高,熔解温度范围较窄。因...
核酸中的Tm值是指?
《生物化学》:Tm值常用DNA的碱基组成分析,(G+C)%=( )×2.44…… Tm-69.3 五个字 A+T含量愈高Tm值愈低的原因是…… DNA中A,T,G,C的含量是一定的,其中A与T以两个氢键配对,G与C以三个氢键配对,当DNA双链中...急求 生物化学 查锡良版 的重点!…… 生物大分子,物质代谢,复制、转录...
名词解释:Tm值
Tm值,即DNA的熔解温度,是指DNA双螺旋结构解旋一半时的温度,其数值受DNA序列中的G-C含量影响,含量越高,Tm值也越高。计算核酸的Tm值是通过监测其在特定波长(260nm)下的吸光度增加,当达到增加量两倍时的温度。对于25mer以下的引物,Tm值的计算公式以碱基组成和温度系数为基础;而对于更长的寡核...
生物化学的“ Tm”是指什么?
①DNA碱基组成:C-G含量越多,Tm值越高;A-T含量越多,Tm值越低。②溶液的离子强度:在低离子强度中,Tm较低,解链的温度范围较宽;在高离子强度中,Tm值较高,解链的温度范围较窄。③PH值:当溶液的PH值在5~9范围内,Tm值变化不明显;当PH>11或PH<4时,Tm值变化明显。④变性剂:各种变...
什么是Tm值?Tm值大小与哪些因素有关?
Tm亦高。经验公式为:(G+C)%=(Tm-69.3)×2.44。(3)溶液的离子强度:离子强度较低的介质中,Tm较低。(4)溶液的pH值:高pH下碱基广泛去质子而丧失形成氢键的能力,pH值大于11.3时,DNA完全变性。pH值低于5.0,DNA易脱嘌呤。(5)变性剂:甲酰胺、尿素、甲醛等可破坏氢键,妨碍碱基堆积,...
生物化学的“Tm”表示的是什么?
熔解温度(melting temperature,Tm)是指吸光值增加到最大值的一半时的温度称为DNA的解链温度或熔点。DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当小的温度内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的解链温度,由于这一现象和结晶的融解过程类似,又称融解温度。熔解和凝固:物质从...
怎么计算Tm值?
引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关。长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size 公式中,Size = 引物长度。用Primer5.0,DNA MAN,DNA ...
解链温度是指什么温度?
一、解链温度详细解释 它被视为引物的一个重要参数,当50%双链DNA分子双链结构被打开时的温度。解链温度的高低与DNA分子的碱基组成相关,其中G+C比例越高,Tm值越高。Tm值的计算公式是Tm=4(G+C)+2(A+T)。解链温度在PCR反应中具有重要参考价值,通常将加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的...
引物的TM值如何计算
Tm= 2℃ (A + T) + 4℃ (G + C)另一种方法来估计长链中GC含量 Tm = 81.5 + 0.41(%GC) - 500/L + 16.6 log[M](L:寡核苷酸的长度;M:1价阳离子的浓度)但这些方法不能消除碱基堆积的影响,结果并不准确,所以近邻法被广泛的应用。但是,对于在60-70 bp或15bp以下的寡核苷酸的...
什么是同源重组, PCR扩增的原理是什么?
由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度: Tm值(解链温度)=...