干涉散射显微术(Interferometric Scattering Microscopy)
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发布时间:2024-10-23 02:46
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时间:2024-12-09 23:59
干涉散射显微术,iSCAT显微术,是一种基于光散射的成像技术,用于追踪纳米尺度的标记物,并实现单分子级别的无标记光学探测,不受染料光化学和光物理学限制,无需荧光标记。
与落射式荧光显微镜相比,iSCAT技术通过收集样品散射的光实现成像,相较于荧光显微镜,它的优势在于避免了玻片反射和荧光背景高的问题,无需对样品进行标记,尤其适用于研究动态生物微环境。
纯散射成像利用物体散射光的特性实现无标记成像和传感,即使单个蛋白质也能实现单分子级传感和成像。在实际操作中,通常选择一种方式获取纯散射信号,以提高成像质量。
基于干涉的成像方法在探测器表面收集散射信号和透射信号,通过它们之间的相干作用形成干涉图。在iSCAT成像系统中,探测到的信号强度与散射光、参考光和相位差有关,通过这一原理实现纳米级别分辨率的成像。
iSCAT显微镜已成功应用于检测单个未标记的蛋白质,由于信号低且存在噪声,要求具有低噪声水平和高灵敏度的探测器,对5纳米级粒子的灵敏检测具有挑战性。