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乙醇引起蛋白质变性实验的实验步骤.

发布网友 发布时间:2022-05-09 19:21

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热心网友 时间:2023-10-14 21:44

乙醇引起的变性与沉淀

取3支试管,编号。依顺序加入试剂:
试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL
试管二: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的NaOH溶液各1mL
试管三: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的HCl溶液各1mL

振摇混匀后,观察各管有何变化。放置片刻,向各管内加水8毫
升,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红.再分别用0.1当量/升醋酸溶液及0.1当星/升碳酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1当量/升盐酸溶液数滴,观察沉淀的再溶解。解释各管发生的全部现象。

首先,只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性,低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构(氢键)破坏而沉淀析出,类似于盐析。其次,变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%,而且最后蛋白会再溶解。因此,这个实验不足以证明蛋白质变性。
后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点,增大蛋白质的溶解度,进而使蛋白质再溶解。
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