腺苷脱氨酶测试方法介绍
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发布时间：2024-10-05 06:15
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时间：2024-10-07 13:38
随着对腺苷脱氨酶(ADA)研究的深入，检测技术历经四代演变。第一代检测法，由Kaplan法（1955年）建立，通过测量265nm处腺苷的吸光度下降速度，但因底物浓度低（40μM以下）可能导致失真，不适合临床使用。
第二代测试基于腺苷脱氨酶的显色反应，如Berthelot法，能测定氨生成量，但灵敏度低，易受外源性NH3干扰。第三种方法是通过偶联GLDH反应测量NADPH吸光度，同样受血清氨和NADPH非特异性氧化的影响。
进入第三代，Kalckar氏采用连续监测法，通过尿酸盐的吸光度上升来测ADA，但293nm的血清吸光度过高，影响临床实用性。而第四代，通过PNP、XOD、过氧化氢酶和醛脱氢酶的反应，测量NADPH吸光度上升，成本高，制约了其在临床中的应用。
最新的改进是将PNP、XOD与过氧化物酶反应结合，利用EHSPT和4-AA进行Trinder氏反应，测定有色醌在550nm处的吸光度上升。这种方法具有高精密度、抗干扰性强，适用于自动化快速测定，为临床ADA检测提供了更好的条件。
扩展资料
腺苷脱氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。
腺苷脱氨酶测试方法介绍
第二代测试基于腺苷脱氨酶的显色反应，如Berthelot法，能测定氨生成量，但灵敏度低，易受外源性NH3干扰。第三种方法是通过偶联GLDH反应测量NADPH吸光度，同样受血清氨和NADPH非特异性氧化的影响。进入第三代，Kalckar氏采用连续监测法，通过尿酸盐的吸光度上升来测ADA，但293nm的血清吸光度过高，影响临床...
腺苷脱氨酶的方法介绍
第一代ADA测试：ADA将腺苷 (Adenosine) 脱氨产生次黄苷(Inosine) 和氨 (NH3）。一个ADA活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨1μmole腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，可以测算ADA的活性大小。Kaplan法 （1955） 由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度...
腺苷脱氨酶检测试剂盒性能指标
腺苷脱氨酶检测试剂盒采用先进的XOD-PAP法（第四代改良法），该方法专一性强，仅与腺苷脱氨酶反应，不受NH4+影响，表现出很高的灵敏度。试剂盒采用液体双试剂设计，可以直接使用，无需复溶，有效减少瓶间差异，操作简便。其线性范围宽广，从0至200U/L，相关系数γ2达到0.99以上，确保了测试结果的准...
ada测试方法演变
最新的第四代改良法，即XOD-PAP法，通过生成有色醌并测量550nm处吸光度上升来测定ADA活性，抗干扰能力强且准确度高。迈克腺苷脱氨酶检测试剂盒性能优异，具有线性范围宽、准确度和稳定性高，以及对多种干扰因素如NH4+无影响的特点，适用于半自动或全自动生化分析仪，并建议实验室根据自身条件建立参考范...
腺苷脱氨酶高什么意思
5. **及时就医的重要性**：如果发现自己的ADA水平升高，应及时寻求医疗专业人士的帮助。医生将结合病史、临床表现和实验室检查结果，综合判断并制定适当的治疗计划。总之，腺苷脱氨酶水平的升高是一个需要关注的指标，它可能与多种疾病状态有关。正确的诊断和治疗需要专业医疗人员的评估和指导。
肝功能检测指标怎么看?
。由于肝脏测试指标都是由肝脏合成的，一旦肝脏合成功能下降，以上指标在血液中浓度随之降低，其降低程度与肝脏合成功能损害程度呈正相关。 肝功能检查指标中反映肝细胞有无受损及严重程度的肝脏测试的项目 谷丙转氨酶ALT(GPT)、谷草转氨酶AST(GOT)、腺苷脱氨酶(ADA)、胆碱酯酶(CHE)、乳酸脱氢酶(LDH)...
4个生命科学导论的问题,万分感谢
当时,两个4岁和9岁的小女孩由于体内腺苷脱氨酶缺乏而患了严重的联合免疫缺陷症。科学家对她们进行了基因治疗并取得了成功。这一开创性的工作标志着基因治疗已经从实验研究过渡到临床实验。1991年,我国首例B型血友病的基因治疗临床实验也获得了成功。 基因治疗的最新进展是即将用基因枪技术于基因治疗。其方法是将特定...
基因的历史
当时,两个4岁和9岁的小女孩由于体内腺苷脱氨酶缺乏而患了严重的联合免疫缺陷症。科学家对她们进行了基因治疗并取得了成功。这一开创性的工作标志着基因治疗已经从实验研究过渡到临床实验。1991年,我国首例B型血友病的基因治疗临床实验也获得了成功。 基因治疗的最新进展是即将用基因枪技术于基因治疗。其方法是将特定...
亲~在线跪求生命科学研究在现代人类社会发展中有哪些应用,要理论联系实 ...
利用生物技术开发出的新疗法也日益增多,在治疗遗传性疾病和免疫系统疾病方面,尤为突出,例如,美国国立卫生研究院的科学家用基因疗法治疗一名腺苷脱氨酶缺乏症的患儿。他们将能分泌腺苷脱氨酶的健康基因注入患儿体内,患儿免疫系统缺陷得到修复,功能恢复正常。我国复旦大学遗传研究所与长海医院合作,采用反转录病毒基因转移...
白塞氏病是比较多见的一种疾病?
白塞氏病与复发性口腔溃疡关系密切，90%-100%的前不见古人均可发生复发性口疮。但其不仅侵犯眼、口及生殖器，而是可使全身多个系统受累的血管炎性疾病，只不过各系统及器官病损发生的时间先后不同。有些病人先出现1-2种器官的病损，以后才有其他器官的病损，由此给诊断带来一定难。本病的主要病因...
