永久装片制作方法
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发布时间：2024-10-09 12:16
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热心网友
时间：2024-10-09 12:32
这里介绍一种常用的石蜡切片制作过程：
首先，选取材料是关键，根据需要选择合适的部位，如洋葱根尖用于观察植物细胞有丝分裂，猪肝小叶适合观察组织结构，豚鼠内耳用于耳蜗研究。新鲜材料是前提，避免因长时间搁置导致蛋白质变性和细胞自溶，影响组织形态。
接着，使用固定液（通常是20倍材料体积）对新鲜材料进行固定，固定液能终止细胞代谢，防止细胞自溶，保持组织结构。固定时间根据材料大小和固定液渗透速度确定，通常几小时至24小时。
固定后，需用流水或酒精冲洗以去除固定液，防止影响染色效果。然后进行脱水，从低浓度酒精开始，逐渐递增至高浓度，以减少组织收缩。正丁醇、叔丁醇等也可作为脱水剂。
透明阶段，用透明剂（如二甲苯、苯）替换酒精，组织块在透明剂中浸渍，直到出现透明状态。透明时间需根据材料特性调整，过短或过长都会影响切片效果。
浸蜡与包埋是关键步骤，用石蜡代替透明剂，先用熔化的石蜡与二甲苯混合液浸渍，再放入石蜡液中，蜡块凝固后迅速冷却成蜡块。包埋时，注意编号，避免混淆。
切片时，修整蜡块，固定在切片机中，保证切片质量。然后用明胶将蜡片粘附在载玻片上，经脱蜡、水化和染色，以呈现不同结构的颜色。
染色是为了区分细胞结构，常用的如HE染色法，通过不同的染色剂和方法，揭示细胞内不同成分。特殊染色针对特定组织结构，亲银性和嗜银性染色用于显示金属银的沉积。
最后，经过梯度酒精脱水、透明和封片，形成永久性玻片标本，可在光镜下长期观察。
