做羟自由基清除实验时可以用去离子水替代双蒸水吗
细菌就可以通过过膜而除去,并不一定非要紫外。纯化不是向水中添加指定的物质,而是从水中除去指定的物质,所以成份有什么不一样,也跟你拿什么水去纯化有关。拿池塘水和自来水的结果当然就不一样。把问题具体到我们实验室,好像比较好回答:我们实验室的去离子水是拿一次蒸馏水来纯化的。而一次蒸馏水...
DMEM一定要用双蒸水配制吗?
当然养不好撒,培养细胞最重要的是要配置的培养基能够严格合格,培养基的成分严格按照所规定的标准,你用的离子水,配成以后培养基当然就会多了一些非培养基要求的离子,这必然会影响你的细胞的培养。你还是用双蒸水再配一次好了。不过在配的时候,要节约点哦,双蒸水比较贵。
DNA重组子的鉴定中使用的AC与ED作用分别是什么?
在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindII...
SDS裂解DNA时,加入TE的浓度是多少?有影响么?
133mMNH4ClNHCl7.12g0.9mMNH4HCO3NH4HCO30.071g0.1mMEDTA0.5mMEDTA0.2ml;最后加灭菌去离子水至1000ml,高压灭菌。ACD抗凝剂:柠檬酸1.68g柠檬酸钠4.62g葡萄糖5.15g;最后加灭菌去离子水至350ml,高压灭菌。提取缓冲液(Extractionbuffer):10mMTrisCl(PH=8.0)1MTris.Cl(PH=8.0)1ml0.1mMEDTA(PH=8.0)0.5mMEDTA(PH=8....
Xho1和Nde1 50μl双酶切反应体系的配制??
如果选用TaKaRa的限制性内切酶那么Buffer应使用H Buffer,对于50 μl的酶切体系而言应分别加入1.5 μl的Xho1和Nde1并且加入5 μl的10×H Buffer(使得酶切体系中的Buffer浓度为1×工作浓度),最后加入适量的质粒分子并双蒸水补足反应体积至50 μl。
为什么会用磁珠法提取基因组DNA的试剂盒?与传统方法相比有哪些优势...
答案是:磁珠法提取基因组试剂盒具有独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞并灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA选择性吸附于磁珠,再通过一系列快速的漂洗-分离的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后用双蒸水即可将纯净基因组DNA从磁珠上洗脱。产品特点有:·不使用有毒的苯酚等试剂...
DNA测序的测序技术
6. 灭菌去离子水或三蒸水。7. 0.2 ml或和0.5 ml的PCR管 盖体分离。8. 3 mol/L 醋酸钠(pH5.2) 称取40.8 g NaAc·3H2O溶于70 ml蒸馏水中,冰醋酸调pH至5.2,定容至100 ml,高压灭菌后分装。9. 70%乙醇和无水乙醇。10. NaAc/乙醇混合液 取37.5 ml无水乙醇和2.5 ml 3 mol/L NaAc混匀,室温可保存...
三种southern杂交转膜方法的比较-钟鼎生物
(8)换用中和液,继续抽气约15 min。(9)转移完毕,硝酸纤维素膜或尼龙膜用去离子水漂洗,然后固定。真空转移法的最大优点是迅速,可在转膜的同时进行DNA变性与中和,整个过程约需 :30〜60 min。但在操作中应注意两个问题:一是真空压力不能太大,若压力过大,凝胶被压缩,转移效率会降低;...
Northern Blot杂交检测实验流程与注意事项——钟鼎生物
总RNA不需要进行酶切,即是以各个RNA分子的形式存在。 (2) RNA电泳 。由于RNA是单链,大部分RNA能通过分子内碱基配对而形成二级结构,因此必须在变性条件下进行电泳。碱性溶液会水解RNA的2'-羟基基团,因此不能进行碱变性,而是采用甲醛或乙二醛和二甲基亚砜(DMSO)等进行变性电泳。常用的是RNA在甲醛-琼脂糖凝胶电泳,...
提取基因组的方法
去上清,加入70%乙醇500μl,以12000rpm,离心5min,去上清,50-60℃干燥。10、加入50μl灭菌去离子水,转弹,混匀。NaI提取法提取外周血白细胞基因组: 实验步骤: 1、取外周抗凝血(全血)100ul于eppendorf管中,12000rpm离心12min。2、弃上清,加双蒸水200ul溶解,摇匀20s。3、混匀后加6MNaI溶液200ul,摇匀20s。4...