己烯雌酚的含量测定
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发布时间：2023-07-24 05:21
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时间：2024-04-14 18:54
方法名称
己烯雌酚原料药－己烯雌酚－高效液相色谱法
应用范围
本方法采用高效液相色谱法测定己烯雌酚原料药中己烯雌酚的含量。
本方法适用于己烯雌酚原料药。
方法原理
供试品经乙醇-水（1：1）溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测己烯雌酚的峰面积，计算出其含量。
试剂
1. 甲醇
2. 乙醇
仪器设备
1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按己烯雌酚反式体峰计算应不低于1000，己烯雌酚反式体峰与顺式体峰的分离度应大于5.0。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：甲醇/水=80/20
2.2 检测波长：254nm
2.3 柱温：室温
试样制备
1. 对照品溶液的制备
精密称取己烯雌酚对照品适量，加乙醇-水（1：1）溶解并定量稀释制成每1mL中约含己烯雌酚0.1mg的溶液，即为对照品溶液。
2. 供试品溶液的制备
精密称取供试品适量，加乙醇-水（1：1）溶解并定量稀释制成每1mL中约含己烯雌酚0.1mg的溶液，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长254nm处测定，按外标法以己烯雌酚顺式体峰面积的1.26倍与己烯雌酚反式体峰面积的和计算出含量。
参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，中国医药科技出版社，2010版，二部，p.39。
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