生物 论坛
发布网友
发布时间:2022-05-01 23:24
我来回答
共1个回答
热心网友
时间:2022-06-30 21:48
新华网2007年8月29日消息 云南省农科院生物技术与种质资源研究所目前为该省分布的3种野生稻建立了基因文库。
云南省农科院生物技术与种质资源研究所副所长程在全博士接受记者专访时表示,在优异种质基因发掘研究方面,研究所首次构建了普通野生稻、疣粒野生稻和药用野生稻cDNA文库和SSH文库,并从中发现和分离获得一大批野生稻重要功能基因cDNA。
此外,该所首次在国际上大规模分离出野生稻抗病基因同源片段,并在GenBank上注册登记新基因片段30个。并且首次从云南普通野生稻中分离克隆抗稻瘟病Pi-ta同源基因2个、抗白叶枯病Xa21同源基因4个,并开展了相关基因结构与功能、比较基因组学和亲缘演化关系的研究,极大地丰富了野生稻基因组学研究的内涵。
野生稻是水稻的原始祖先,被专家称为“植物中的大熊猫”,蕴藏着十分丰富的优良基因。世界上目前共有20种野生稻种,其中中国有3种,即药用野生稻、普通野生稻和疣粒野生稻。中国野生稻在云南分布最广,生态类型多。
大肠杆菌感受态细胞的制备和转化——CaCl2法
第一节 概 述
在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。
转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。
转化过程所用的受体细胞一般是*修饰系统缺陷的变异株,即不含*性内切酶和甲基化酶的突变体(Rˉ,Mˉ),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法(如电击法,CaCl2 ,RbCl(KCl)等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Compenent cells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制,表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养,即可筛选出转化子(Transformant,即带有异源DNA分子的受体细胞)。目前常用的感受态细胞制备方法有CaCl2和RbCl(KCl)法,RbCl(KCl)法制备的感受态细胞转化效率较高,但CaCl2 法简便易行,且其转化效率完全可以满足一般实验的要求,制备出的感受态细胞暂时不用时,可加入占总体积15%的无菌甘油于-70℃保存(半年),因此CaCl2法为使用更广泛。
为了提高转化效率, 实验中要考虑以下几个重要因素:
1. 细胞生长状态和密度: 不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌,最好从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好,可通过监测培养液的OD600 来控制。DH5α菌株的OD600 为0.5时,细胞密度在5×107 个/ml左右(不同的菌株情况有所不同),这时比较合适。密度过高或不足均会影响转化效率。
2. 质粒的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态DNA(cccDNA)。转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,转化效率就会降低。1ng的cccDNA即可使50μl 的感受态细胞达到饱和。一般情况下,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%。
3. 试剂的质量: 所用的试剂,如CaCl2 等均需是最高纯度的(GR.或AR.),并用超纯水配制,最好分装保存于干燥的冷暗处。
4. 防止杂菌和杂DNA的污染:整个操作过程均应在无菌条件下进行, 所用器皿, 如离心管, tip头等最好是新的,并经高压灭菌处理,所有的试剂都要灭菌,且注意防止被其它试剂、DNA酶或杂DNA所污染, 否则均会影响转化效率或杂DNA的转入, 为以后的筛选、鉴定带来不必要的麻烦。
本实验以E.coli DH5a菌株为受体细胞,并用CaCl2处理,使其处于感受态,然后与pBS质粒共保温,实现转化。由于pBS质粒带有氨苄青霉素抗性基因(Ampr ),可通过Amp抗性来筛选转化子。如受体细胞没有转入pBS,则在含Amp的培养基上不能生长。能在Amp培养基上生长的受体细胞(转化子)肯定已导入了pBS。转化子扩增后,可将转化的质粒提取出,进行电泳、酶切等进一步鉴定。
比较有名的生物论坛?
比较有名的生物论坛包括小木虫、生物谷和丁香园等。小木虫是一个以学术科研为主题的互动交流平台,其中生物科学板块汇聚了大量生物学领域的专家、学者和研究生。这个论坛涵盖了从分子生物学到生态学等各个分支领域的内容,用户可以在这里发布最新的科研成果、交流实验技术,以及寻找合作伙伴。小木虫因其专业性和...
比较有名的生物论坛?
还有小木虫,丁香园,以及最新兴起的帮研网,是个科研互助平台,免费提问,有问必答,答题赚钱。还有最新生物科研资讯、资源共享、论坛交流等。
生物秀中国生物科学论坛
在中国科学界,有一个备受瞩目的学术交流平台,那就是生物秀中国生物科学论坛。这个论坛汇集了广泛的学科领域,拥有约100个专业版块,几乎囊括了生命科学的所有分支以及相关的交叉学科。它为生物领域的专业人士提供了一个理想的学术交流与问题研讨的场所。论坛的会员数量庞大,已达20万人,其中98%以上的成员...
生物秀的中国生物科学论坛
生物秀论坛又名中国生物科学论坛,目前有近100个版块,基本涵盖了生命科学的所有专业及交叉学科,是生物专业相关人员进行学术交流、问题探讨和互帮互助的最专业的学术论坛之一,注册会员数已经达到近20万人,本科以上学历占98℅以上,在行业内具有很高的知名度和影响力。
生物科研方面那个论坛最好?
宁馨谷为非营利性个人网站,旨在为对计算生物学有兴趣的人士和生物数据分析遇到问题的朋友提供一个自由开放的交流互助空间。计算生物学是个正在发展成型的交叉学科,生物学、数学、计算机、化学、物理学为其支撑,其交叉学科的优势及巨大发展潜力吸引了众多非生物学专业人士的兴趣,然而隔行如隔山的现状使得...
生物秀论坛要怎样注册呢
首先,访问生物秀论坛的官方网站。在网站首页,通常会有一个明显的“注册”按钮或链接,点击它进入注册页面。在注册页面,你需要填写一些基本信息,如用户名、密码、电子邮件地址等。这些信息是注册过程中必不可少的,用于创建你的个人账户和确保你的账户安全。其次,填写完基本信息后,可能需要...
有生物实验的论坛吗
有生物实验的论坛。有许多生物实验的论坛可以提供相关的讨论和交流平台。例如,ResearchGate是一个专注于科学研究的社交网络平台,其中包括许多生物学家和实验室的成员,可以在该平台上分享实验经验、讨论研究结果等。此外,Bio-Protocol是一个专门发布生物实验方法和技术的在线平台,研究人员可以在该平台上找到...
学习生物信息学有哪些比较好的网站或论坛?
论坛篇:生信技能树:亲切的成长伙伴,见证你的学习旅程。生物信息学天空:内容全面的生信论坛,带你领略生信的全貌。丁香园(生信板块):国内知名论坛,医学生必去之地。小木虫:资源丰富,国内另一个重量级论坛。生物统计家园:有待你探索的统计领域宝藏。基因堂:聚焦基因科学,扩展你的知识视野。biostars...
微生物学方面什么论坛比较好些
小木虫比较全,各个学科都有;生物谷就比较专一些,植物、动物、分子、细胞和微生物都有;而专门微生物的没有很出名的大型论坛。
生物科学论坛藻蓝蛋白和藻红蛋白有什么区别
藻红蛋白(P-phycoerythrin,PE)是从红藻中分离纯化的,目前普遍使用地新型荧光标记试剂。在特定波长激发下,藻胆蛋白能发射强烈的荧光,其荧光强度是荧光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。藻蓝蛋白是从螺旋藻中分离出的一种深蓝色粉末。主要存在于...