谁知道激光共聚焦显微镜可以观看活组织样本吗?
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发布时间：2022-04-20 14:27
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时间：2023-09-09 06:45
CLSM为生命科学开拓了一条观察生命活细胞的结构及特定分子、离子生物学变化的新途径，成为分子细胞生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。共聚焦及双光子具有以下优点： 1.荧光标记的特异性及可定量性。 2.共聚焦针孔的运用，有效的消除了焦平面上下散射光，提高轴向分辨率。 3.点光源激光的应用，对荧光素能达到有效的激发，激发的特异性高，降低对荧光的淬灭，增强侧向分辨率。 4.双光子的应用，相对较低平均功率的红外激发，大大减低对活细胞的损伤；荧光激发高度聚焦在焦点处，可避免了焦点以外的光漂白（Photobleaching）和光毒（cytotoxicity）作用，延长观察时间，是目前用于活细胞跟踪的最理想方法。 5.脉冲激光散射和吸收程度小，透射性强，对厚样品的穿透可达400um，是对厚的组织分析的最首先方法。 6.结合META新技术，尤其对荧光蛋白成像具有更方便，更精确的效果。应用领域：共聚焦及双光子在现代生物学研究中有如下应用： 1.多色荧光成像(Multi-color imaging)，具有多磁道和双向扫描，曲线扫描等特性。 2.三维重构（Three dimentional reconstruction）及定量分析。 3.实时成像（Time series,real time imaging），可进行活细胞跟踪。 4.离子成像（Ion imaging）/比率成像（Ratio imaging），可进行Ca2+,Mg2+,H+,Na+,K+,Zn2+,Ni2+,Fe2+,Hg2+,Pb2+及Cd2+等成像。 5.荧光原位杂交（FISH:fluorescence in situ hybridization）； 6.荧光漂白恢复（FRAP：fluorescence recovery after photobleaching）； 7.荧光共振能量转移（FRETM:fluorescence resonance energy transfer； 8.光生命期成像显微术（FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy）。
