求问表达感受态BL21DE3可否提取质粒
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发布时间：2022-05-01 06:58
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时间：2022-06-25 19:51
可以~质粒提取说明书上有针对不同菌株适合的提取方法~但BL21是表达型菌株不适合提取质粒用~
求问表达感受态BL21DE3可否提取质粒
可以~质粒提取说明书上有针对不同菌株适合的提取方法~但BL21是表达型菌株不适合提取质粒用~
大肠杆菌质粒裂解系统
大肠杆菌质粒裂解系统是一种常用的生物技术工具，用于从大肠杆菌细胞中提取质粒DNA。该系统利用特定的化学物质或酶，破坏大肠杆菌细胞的细胞壁和细胞膜，使质粒DNA得以释放。随后，通过离心和纯化步骤，可以从裂解物中分离出高质量的质粒DNA。这一过程对于基因工程、分子生物学和生物技术等领域的研究至关重要，因为它允许科学家们在体外操作、复制和编辑DNA，以推动科学研究和技术创新。利穗科技（苏州）有限公司于2009年在苏州生物纳米园成立，为国家高新技术企业。目前，利穗拥有45000平米的生产基地及3500平米的应用开发实验中心，员工人数超过450人。利穗是生物制药行业下游纯化设备制造商和工程解决方案提供商，服务超过1000...
关于表达质粒转化BL21(DE3)的问题
转化成功的E.coli细胞会带有Kana抗性，不怕Kana，没转化成功的无法在含有Kana的琼脂板子上生长。不需要蓝白斑，就挑取能在上面生长的菌落就可以了，那些都是已经成功转化、带有质粒的菌。
BL21(DE3) 感受态细胞
T7噬菌体RNA聚合酶由整合在BL21染色体上的λ噬菌体DE3区提供，这样，它们能够同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，以适用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。操作时，首先需将100μl冰上融化的BL21(DE3)感受态细胞加入目的质粒并轻轻混匀，然后在冰上静置25分钟。接着，将细胞置于42℃水浴中...
各种感受态细胞有什么区别、用途?
基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。用途：分子克隆和质粒提取。BL21(DE3)菌株 基因型：F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7...
BL21(DE3)菌株转化效率低怎么办?
这样，可以直接在BL21(DE3)构建表达质粒，避免了从DH5α等菌株提取质粒再转化的步骤，显著提高基因编辑效率和阳性菌落获取。对于其他转化效率低的菌株，同样适用这种方法。虽然基因编辑工作量较大，但是一次性敲除防御系统后，转化效率显著提升，且效果持久，是提高BL21(DE3)转化效率的有效途径。
【菌周刊】简析大肠杆菌BL21及其衍生菌株
BL21-CodonPlus(de3)-RIPL菌株源自Stratagene公司的BL21-Gold菌株，通过基因改造减少了对重组蛋白的降解，并补充了大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子（AGA, AUA, CCC, CUA）对应的tRNA，提高了外源基因在原核系统中的表达水平。该菌株适用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达，并具有四环素、氯霉素、链霉素、...
JM109,DH5a,BL21感受态有什么区别?
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于...
求问:转染抗性质粒后的BL21DE3在含Amp的LB培养基上培养了15h仍然没有...
几个可能的原因：1、质粒对应抗性错误 2、培养基抗性标记错误 3、噬菌体污染（但应该出现噬菌斑，而不是空板）4、转染过程出现操作失误，没有转进去 5、质粒浓度不够或者时间太久有降解（建议跑agrose胶检验一下） 6、感受态坏了。。。具体情况你可以自己分析一下。
大肠杆菌感受态制备时为什么用无抗性的培养基?
因为感受态细胞本来就不具备抗性。后期用载体质粒转化感受态细胞时，我们就是根据 转化成功的大肠杆菌（载体质粒进入该感受态细胞）能在含抗生素的培养基上生长 而转化不成功（载体质粒没有进入感受态细胞）的感受态细胞则由于没有抗性而不能生长 这一原理来判断是否转化成功。
bl21用化转还是电转
噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。BL21(DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。青旗生物生产的BL21(DE3)电转感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率，可用于各种多肽，蛋白表达文库的...
