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PCR-DGGE分析真菌多样性,采用巢式PCR扩增,请问第一次PCR产物需要经过纯化...
发布网友
发布时间:2024-01-11 02:33
我来回答
共
2
个回答
热心网友
时间:2024-08-15 22:11
第一次产物是不必要纯化的。之所以要做巢式,就是因为第一次的产物量很少或者扩增的条件不优化。属于一个优化实验条件的步骤。
你可以做一个系列稀释,比如你第二次飞反应体积是20微升,可以不稀释,直接加1微升第一次反应的产物。其他的管子可以进行系列稀释,根据结果再做调整。
最优条件有可能要反复几次才能得到
热心网友
时间:2024-08-15 22:10
纯化一下,降低退火时间,注意交叉污染
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