真核表达蛋白是分泌表达还是胞内表达
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发布时间：2022-04-21 02:44
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热心网友
时间：2022-06-17 12:51
一般的话，原因答题是可以分为两种：
①不表达，从基因上开始分析，无论是用那种宿主表达蛋白，真核表达或是原核表达，都要考虑到基因优化的层面，如果基因本身不适在此系统中表达，那么下游在怎么优化也是不表达的
②表达条件的优化，转染效率是否转染成功，细胞培养细胞生长的状态，这些条件是可以通过自己优化解决的
此外，真核细胞蛋白表达，载体的选择是很重要的，因为利用哺乳动物细胞表达蛋白，你是用的是瞬时转染表达技术，瞬转效率本身也不高，1mg的质粒摇1l也就能得到1mg左右的蛋白，所以载体的选择很关键。
如何在真核生物中抽取表达蛋白?
如果是分泌蛋白，可以从培养上清中纯化。如果是胞内蛋白，最好在蛋白上接一个TAG，比如FLAG-TAG，然后用FLAG的抗体进行亲和纯化。
重组人转铁蛋白， 转铁蛋白在细胞培养中的关键作用
欢迎来电咨询：13051765615 杨经理简介：转铁蛋白又称为血清转铁蛋白、β-1 金属结合球蛋白、TF。转铁蛋白主要存在于血浆中，是一种铁结合血浆糖蛋白，负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁，以三价铁复合物（Tf-Fe3+）的形式进入骨...
求助:真核还是原核表达
而原核表达则通过直接转化细菌，利用ISPG诱导，蛋白以包涵体或分泌形式存在，可能缺乏真核基因的完整修饰，但易于纯化。真核表达则依赖于脂质体或PEI等转染试剂，实现瞬时表达，质粒会被降解，不能稳定扩增，适合研究基因功能而非蛋白纯化。真核表达在昆虫细胞的杆状病毒表面展示系统中也有应用，通过转染重组质...
真核生物的基因能在原核生物中表达吗?原核生物能在真核生物中表达吗?为...
可以，原因就是转录翻译。蛋白表达可以先抛开真核生物基因或原核生物基因，不管他是什么基因反正都是一段序列就行了，只要是一段基因序列，将这段序列克隆到载体上，赋予它转录翻译所需要的条件，他就会表达成为蛋白。接下来要分的就是表达系统是原核表达系统还是真核表达系统，现在用的最多的是原核表达...
真核原核表达系统的优缺点?
真核的:蛋白表达活性一般较好,但是周期相对较长,一般是首先考虑原核表达,无效表达或者表达出的蛋白活性太低的时候才选用真核。但真核表达比如酵母表达系统,有时候融合蛋白蛋白糖基化可能会改变蛋白的分子量,进而改变其一些重要的生物学功能。2 你用RT-PCR作为关键词在百度知道中搜索3 摆渡质粒4 跑个PCR你要问什么...
基因原核表达的详细过程
对于真核细胞来说,核糖体按其在细胞质中的位置分为游离核糖体(合成细胞质蛋白)和内质网核糖体(合成分泌蛋白和细胞器蛋白)。不论原核细胞还是真核细胞,一条mRNA可以被同时几个核糖体阅读,把同时结合并翻译同一条mRNA的多个核糖体称为多核糖体。一、 核糖体的结构与组成核糖体是由核糖核酸(称为核糖体核酸, ...
真核细胞中,蛋白质的合成的场所,到底是核糖体还是细胞质?
是细胞质，mRNA在细胞核中转录得到，然后结合在粗面内质网的核糖体上，开始合成肽链并形成一定的结构，通过内质网，高尔基体修饰转运成为成熟的蛋白质。而核糖体就是在细胞质中的，但是核糖体完成的部分比较重要，一般说在核糖体上！
真核表达系统与原核表达系统的异同?
1、真核基因表达调控过程更复杂；2、在染色质结构上，原核细胞的DNA是裸露的，而真核细胞DNA包在染色体中；3、在原核细胞中的染色质结构对基因的表达没有明显的调控作用，而在真核细胞中染色质的变化调控基因表达，并且基因分布在不同的染色体上，存在染色体间基因的调控问题；4、真核生物中编码蛋...
真核细胞表达和原核细胞表达有什么不同?他们表达产生的活性蛋白有什么不...
首先得从细胞的结构说起：真核细胞具有各种胞内细胞器，而原核细胞却除核糖体之外不存在其他细胞器。这与基因的表达是密不可分的。真核细胞的基因是有外显子和内含子组成的，而原核细胞却无此之分。在细胞内DNA进行转录是都是从启动子开始，按照碱基互补配对原则依次进行。只是翻译产物会有所不同，...
蛋白的表达与纯化
载体构建好了，下面就是重组蛋白的表达了。这一过程涉及到用多少的诱导剂，诱导多少时间才能得到最多的蛋白的问题，即优化表达条件。就是在上述不同量诱导剂诱导条件下，取菌体上清(分泌型)或者破碎细胞(胞内表达的蛋白)电泳，看是否得到目的分子量大小的蛋白 4 蛋白表达成功，下面是根据蛋白质本身亲水/...
原核表达载体和真核表达载体的区别
真核表达载体具有neo基因，可以采用G418来筛选已成功转染了该载体的靶细胞。这些特殊的结构可以实现目的基因在靶细胞内的稳定表达。三、获得目的基因方式不同：pEGFP-N1载体从结构上看，质粒具有很强的复制能力，可以满足随宿主细胞分裂时跟随胞质遗传给新生的子细胞，这是真核细胞表达载体保证目的基因稳定表...
