微生物计数方法验证需要怎么准备
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发布时间：2022-04-24 00:40
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时间：2023-07-28 21:20
微生物限度检查方法学验证
1、供试品：XXXXX胶囊（批号：XXXXXX）
2、菌种：
菌落计数用菌种：
(1) 枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]
(2) 金*葡萄球菌[CMCC（B）26003]
(3) 大肠埃希菌[CMCC（B）44102]
(4) 白色念珠菌[CMCC (F) 98001]
控制菌检查用菌种：
(1) 大肠埃希菌[CMCC（B）44102]
(2) 金*葡萄球菌[CMCC（B）26003]
3、培养基：营养肉汤培养基、改良马丁培养基、营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4-甲基伞形酮葡糖苷培养基（MUG）。
4、预试验 按照中国药典2005年版微生物限度检查法中常规法及培养基稀释法检验，金*葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的回收率均小于70%，本品有抑菌作用。
5、细菌、霉菌及酵母菌计数
按照中国药典2005年版微生物限度检查法进行细菌、霉菌及酵母菌计数的方法学验证试验及菌落计数。
5.1菌液制备：
(1) 接种金*葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml营养肉汤中，35～37℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。
(2) 接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，23～28℃培养24～48小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。
5.2 供试液的制备 取供试品10g，pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇，使呈1：10的供试品储备液。取1：10的供试品储备液 10ml
