提取的总RNA跑胶为什么只有3条带
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发布时间：2023-01-19 14:22
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时间：2023-06-23 20:34
三条是主带
哺乳动物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和小RNA，根据分子量和沉降系数的不同，rRNA又可分为28s, 18s 和5s 的rRNA。从RNA的含量上看，rRNA是几种RNA中最多的，高达90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他两种RNA的分子量比较小，这就解释了为什么从凝胶电泳的结果上只能看到三条带。而这三条带的完整性，就代表了mRNA的完整性，也就是说如果我们观察到这三条带是清新完整，就说明我们提取到的RNA质量比较好，反之，如果观察到这三条带成弥散状，就说明我们提取到的RNA比较不好。
核糖体RNA(ribosomal RNA，rRNA)是组成核糖体的主要成分。核糖体是合成蛋白质的工厂。在大肠杆菌中，rRNA量占细胞总RNA量的75%-85%，而tRNA占15%，mRNA仅占3-5%。
rRNA一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体（ribosome），如果把rRNA从核糖体上除掉，核糖体的结构就会发生塌陷。
原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。S为沉降系数（sedimentation coefficient），当用超速离心测定一个粒子的沉淀速度时，此速度与粒子的大小直径成比例。5S含有120个核苷酸，16S含有1540个核苷酸，而23S含有2900个核苷酸。而真核生物有4种rRNA，它们分子大小分别是5S、5.8S、18S和28S，分别具有大约120、160、 1900和4700个核苷酸。
RNA样品电泳后，可见28S、18S及5S小分子RNA条带，则说明完整性好。若有降解可能是操作不当或污染了RNase.。28S和18S RNA比值约为2：1,表明RNA无降解。如比值逆转，则表明RNA降解。
应该从下到上：5s、18s、28s、
120、1900、4700bp、
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条，
5S，18S，28S。 5S应该最暗，28S应该最亮。和DNA Marker比较的话，28S大概在5K左右，18S大概在3K左右，5.8S和5S是用琼脂糖是分开不了的，只是一条很弱的条带，在100BP左右，好的RNA要求28S亮度是18S的两倍。
