流式细胞仪可以检测caspase3吗
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发布时间：2022-04-23 09:42
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热心网友
时间：2023-10-09 20:24
目前有两种方法用在流式检测：
特异性的针对激活的caspase3的荧光抗体
携带荧光染料的caspase3的底物，进入细胞后，如果有激活的caspase3, 荧光染料被释放，DNA被染，流式检测阳性细胞就可以了。
如何进行Caspase-3活性的流式细胞术检测
目前有专用的试剂：荧光染料和caspase-3的底物结合，加入细胞培养液，细胞可以自由摄入。进入细胞后，底物被活化的caspase3或者7降解后，释放的荧光染料进入细胞核，染色DNA。流式细胞仪检测，只要是和阴性对照相比荧光信号增高的，就是有caspase激活的。荧光强度越高，酶的活性越强。这个试剂 life technology...
请教caspase-3的检测方法问题
检测Caspase－3活性还可以选用流式细胞仪来做，且可同时测定Caspase－8等的活性(多通路)。
细胞凋亡检测方法汇总
此外，线粒体膜电位检测、活化的caspase-3检测和DNA片段化的检测也是细胞凋亡的检测方法。线粒体膜电位的改变可通过JC-1染料检测，活化的caspase-3检测则需通过特异性抗体标记，DNA片段化检测则利用FITC标记的DUTP或BrdU掺入到DNA缺口，通过检测信号强度判断片段化程度。每种方法都有其特点和适用场景，选择...
如何用流式细胞仪检测细胞凋亡?
Caspase家族可以检测的分子非常多，也有不少商业的试剂盒可以应用。即使没有相应的试剂盒，只要有相应抗体基本上是可以检测的，具体的方法是参照细胞内蛋白检测的步骤。在细胞凋亡过程中伴随着一系列的形态特征改变，细胞膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中，细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞...
怎样鉴定细胞凋亡
Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期...
caspase是什么
caspases是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶。它们的活性位点均包含半胱氨酸残基，能够特异性切割靶蛋白天冬氨酸残基后的肽键。因此caspases意为“天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶”。caspases负责选择性地切割某些蛋白质，切割的结果是使靶蛋白活化或失活，而非完全降解。
青蒿素对人胃癌细胞的抗肿瘤机制
高、中、低剂量青蒿素组及5-Fu组流式细胞仪检测时均出现明显的凋亡分布 ,凋亡率分别为92％、78％、53％、61％,酶标仪检测Caspase-3活性发现随着青蒿素剂量的增加Caspase-3活性逐渐增加 ,其中高剂量青蒿素活性增加最显著。结论:青蒿素在体内可通过活化 Caspase-3诱导细胞...
细胞凋亡的检测
用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。 细胞凋亡晚期中,核酸内切酶(某些Caspase的底物)在核小体之间剪切核DNA,产生大量长度...
细胞系建好了,表型实验想好怎么做了吗?
细胞周期的检测方法是简便直观的碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）染色-流式分析法。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比，因此可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，由于细胞周期各时相的DNA含量不同，根据DNA含量的分布情况，可以将细胞周期...
如何证明线粒体与凋亡细胞息息相关
因线粒体穿膜电位的改变，它以单体形式存在于细胞液中，发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是，这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。
