丙烯酰胺单体转化率的测定方法
1. 紫外分光光度法 根据丙烯酰胺单体和聚合物分子之间吸收紫外线的差异,可以利用紫外分光光度法来测定丙烯酰胺单体的含量及其转化率。具体操作方法为:取样品后,通过离心等方法将聚合物分离,然后用紫外分光光度计测量剩余丙烯酰胺单体的吸光度,再根据吸光度与丙烯酰胺单体的标准曲线计算出丙烯酰胺单体的...
聚丙烯酰胺浓度测定方法
聚丙烯酰胺浓度测定方法:黏度法、次氯酸钠氧化法(浊度法)、淀粉一碘 化镉法、凝胶色谱法、Kiel—dah定氮法、沉淀法等。一、试剂 1、丙烯酰胺:分析纯;2、异丙醇:分析纯;3、无水乙醇:分析纯;4、无水甲醇:分析纯;5、去离子水或二次蒸馏水。二、仪器 1、液相色谱仪带有可变波长检测器和10mV...
Acr/Bic作用
溶解后,用浓盐酸调pH至6.8,最后用超纯水定容至250ml,室温下保存。40%Acr/Bic(37.5:1) 丙稀酰胺(Acr) 37.5g甲叉双丙稀酰胺(Bic) 1g超纯水至 100ml溶解后4℃保存。使用时恢复至室温且无沉淀。20%Tween20 Tween20 20ml蒸馏水至 100ml混匀后4℃保存。(二)使用液单去污剂裂解液(PMSF): 1mol/L Tris·HCl...
急求!!DNA测序的问题
Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸 (dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地...
求RT-PCR 流程和注意事项
4、电泳与放射自显影(1)配制凝胶:(50ml)40%丙烯酰胺-亚甲双丙烯酰胺(19:1) 6.25ml 5TBE 10ml 尿素 24g 加H2O至50ml 溶解后加入25%过硫酸胺50l,TEMED 50l,混匀,注入电泳槽中,插入梳,待胶凝固。(2)预电泳以1TBE为上下槽电泳缓冲液,加上电压后进行预电泳,如果用测序电泳装置,电压应达2000v以上,功率设定...
考马斯蓝染料(R-250, G-250,原理,使用,步骤)
考马斯蓝染色的原理基于染料分子在不同pH值下呈现的不同电荷状态,从而导致颜色变化。在pH值小于0时,G250染料会腐蚀所有带正电荷的三个氮原子,显示红色,最大吸收波长为465nm。当pH值约为1时,染料总电荷为+1(2-磺酸基团带负电,因为它们的pKa极低),染料变为绿色,最大吸收波长为620nm。当pH...
请大家帮忙翻译一下啦(续上)
用分光光度计(Tecan Magellan)测定其在442 nM处的吸光度。为了便于控制,将溶菌液在90℃保温15分钟以灭活酶活性,然后 加入100 μl胰蛋白酶(2.5 mg/ml)用以正调节。明胶—SDS—PAGE分析蛋白酶 这种SDS—PAGE需要蛋白溶液和明胶,而明胶通常用丙烯酰胺凝胶。电泳之后,蛋白质会侵入明胶,用Coomassie ...
怎样去除蛋清中的鸡卵类粘蛋白?
实验三 PPO活性测定一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.8的0.2M磷酸氢二钠...
等点聚焦电泳的操作步骤
1. 配胶 胶浓度 5.0% 4.8% 5.0% 胶液总体积 8ml 10ml 12ml 丙烯酰胺贮液 1.33ml 1.60ml 2.0ml Ampholine 0.40ml 0.50ml 0.60ml TEMED 0.008ml 0.010ml 0.012ml 蛋白质样品 0.080ml 0.100ml 0.120ml H2O 2.26ml 2.79ml 3....
电泳法简介
7 五、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R''<[m]>)的大小完全取决于分子量的高低,因此...