提取酵母菌DNA时 可用石英砂辅助破碎细胞吗
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发布时间:2022-09-28 17:04
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热心网友
时间:2天前
影响不大。欲破碎酵母细胞,提取胞内活性物质。尝试了超声波处理,热水处理,石英砂研磨,SDS,DMSO,甲苯处理,反复冻溶等方法,镜检观察效果都很不理想。
酵母是单细胞真核生物,细胞膜外有细胞壁,抽提酵母基因组DNA的关键是破坏细胞外的细胞壁。酵母裂解酶(Zymolyase)或溶壁酶具有酵母细胞壁酶的活性,本方法采用蜗牛酶处理去除酿酒酵母细胞壁。去壁后的酿酒酵母细胞用SDS溶液处理,使细胞破裂,并使蛋白质变性,释放基因组DNA,再利用乙酸钾溶液低温处理,使基因组DNA充分复性,溶解于水,最终通过乙醇沉淀获得基因组DNA。这一方法避免使用酚和氯仿等有机溶剂,操作更为简单,安全。