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聚丙烯酰胺凝胶制备

发布网友发布时间：2022-06-30 13:40

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热心网友时间：2023-10-11 20:06

(1)30%丙烯酰胺溶液取丙烯酰胺60g与亚甲基双丙烯酰胺1.6g，加水至 200ml，滤纸滤过，避光保存。 (2)分离胶缓冲液取三羟甲基氨基甲烷36.3g、加水70ml，用盐酸调节pH值至8.8，加水至100ml。 (3)浓缩胶缓冲液取三羟甲基氨基甲烷6.0g、加水70ml，用盐酸调节pH值至6.8，加水至100ml。 (4)电泳缓冲液取三羟甲基氨基甲烷6.0g、甘氨酸28.8g、十二烷基硫酸钠1.0g，加水至1000ml。 3.操作法 (1)制胶用30%丙烯酰胺溶液－分离胶缓冲液－20%十二烷基硫酸钠溶液－10％过硫酸铵溶液（新鲜配制）-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液，灌入模具内至一定高度（剩余体积留作制备浓缩胶用），用水封顶，聚合完毕，倾去水层。再用30%丙烯酰胺溶液-浓缩胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10％过硫酸铵溶液-四甲基乙二胺-水(0.8∶1.3∶0.025∶0.05∶0.005∶2.4)制成浓缩胶液，灌在分离胶上，插入样品梳（如为圆盘电泳，用水封顶），待浓缩胶液聚合后，小心除去样品梳或水。

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