人类基因组的测序是怎么进行的?求测序的方法及步骤
发布网友
发布时间：2022-04-28 16:56
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热心网友
时间：2022-06-19 20:22
如果楼主指的是人类基因组计划，那时用的方法叫做双脱氧终止法，也叫做sanger法。它的原理是在DNA合成过程中，DNA聚合酶能够使用ddNTP(双脱氧核苷酸）来作为原料，但它的反应会在加入ddNTP的时候终止。具体实验是通过PCR来完成的，但与普通PCR不同，它只需要一个引物而不是一对。在4个相同的反应体系中分别加入普通的dNTP以及4种不同的ddNTP（比如体系1里面缺少dATP，而有ddATP,以此类推）。假设四个体系中分别加入的是ddATP, ddGTP, ddCTP和ddGTP我们就分别把这个叫做A，G，C，T体系，然后每个体系中，会在遇到相应碱基的时候停止反应，这样就产生了一系列长度不一并且分别在以A,G,C,T时终止的DN*段，比如A体系中的DN*段，都是以A结尾的DNA 。接着我们拿着这些片段去进行一个高分辨率的电泳（能够区分出一个碱基的差别)，然后根据电泳结果，我们就能读出序列了。
最早的测序方法就是这样，但是这种方法极其费时间，它需要首先将DNA打断成无数合适的小片段，然后再在完成测序后将其拼接起来。这就是为什么当时人类基因组计划需要那么多国家合作并且耗费那么多时间的原因。
当然，现代的第二代DNA测序技术已经普及了，它们相比第一代测序技术而言，具有低成本，高通量，短耗时等优点。如果用第二代DNA测序技术去完*类基因组测序的话，现在最多也就耗时一个月左右。追问用同一种*性核算内切酶切水稻的全部的基因组DNA，是怎么进行DNA序列的测定？
追答酶切是为了片段化基因组DNA，无论是第一代还是第二代测序法，他们都不能在一个反应中完成很长的测序反应。所以需要把DN*段化成一定长度（200－300bp左右），然后来测序的。对于以前没有完成过测序的物种，需要用不同的方式来片段化再进行测序，将几套测序结果的数据综合后，用特定的算法来拼接序列。现代第二代测序和第一代测序法最大的不同是，第一代测序法能够同时进行的测序反应数目有限，而且必须在反应完成后再进行序列读取。而二代测序法则是同时进行数百万以上的测序反应，并且边反应边测序。所以效率很高。所以酶切反应无论是一代测序法还是二代测序法，都是必要的过程。在二代测序技术普及以后，测序本身不是很耗时间的事情，耗时间的就是后期的一个序列拼接，不过这个都是由计算机来完成的，相对于一代测序法其实也不算很耗时间。
热心网友
时间：2022-06-19 20:23
那时还是12年前，用的sanger法，6国合作的。成本极高。现在基本用hiseq，454了。sanger只是辅助和验证。组装软件也非常的多。杂体的组需要建文库辅助WGS
建议看这方面文章。
人类基因组的测序是怎么进行的?求测序的方法及步骤
最早的测序方法就是这样，但是这种方法极其费时间，它需要首先将DNA打断成无数合适的小片段，然后再在完成测序后将其拼接起来。这就是为什么当时人类基因组计划需要那么多国家合作并且耗费那么多时间的原因。当然，现代的第二代DNA测序技术已经普及了，它们相比第一代测序技术而言，具有低成本，高通量，短耗...
什么是全基因组测序
其过程涉及几个关键步骤：首先，从生物体中提取DNA，然后将其随机打断，通过电泳技术筛选出特定长度的片段。接着，对这些片段的末端添加连接器，形成DNA簇，并进一步制备。最后，借助Paired-End或Mate-Pair技术对这些片段进行测序。测序结束后，通过组装Contig和利用Paired-End间的距离信息，可以构建出染色体的...
基因组学的测序方法(DNA)
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基因组测序的具体过程
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人类基因组计划到底是怎么测序的?
测定组成人类染色体的30亿个碱基对的核苷酸序列，从而绘制人类基因组图谱，并辨识其载有的基因及其序列，达到破译人类遗传信息的最终目的。人类基因组计划在研究人类过程中建立起来的策略、思想与技术，构成了生命科学领域新的学科—基因组学，也可以用于研究微生物、植物、动物。人类基因组计划与“曼哈顿原子弹...
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方法 人类基因组DNA提取的方法主要包括以下步骤：1.细胞裂解：将人类细胞放入离心管中，加入细胞裂解缓冲液，使细胞裂解，释放出细胞内的DNA。2.蛋白质沉淀：加入蛋白酶，将细胞内的蛋白质降解，使DNA得以分离。3.DNA沉淀：加入酒精，使DNA从溶液中沉淀出来。4.洗涤：将DNA沉淀物用乙醇洗涤，去除杂质。5...
全基因组测序技术
问题一:全基因组测序的技术路线 提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA片段(0.2~5Kb),加上接头, 进行基因簇cluster制备或电子扩增E-PCR,最后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成...
基因组测序
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DNA序列是怎么测量出来的?
最后得到的序列长度相对传统方法就短一些。 短的问题是，它很难作 de novo 的测序，就是说，因为短序列之间的交叠太少，就无法从短序列合成出全部基因组（事实上，就是传统的 sanger 法，在染色体末端，因为有大量的重复序列，也是无法很好的测出的，所以人类基因组推出时，这段是没有的）。所以...
既然人和人的核苷酸排列顺序不同,人类基因组计划怎么测序
1. 首先，该计划并没有测序所有人类细胞的DNA。就算是你自己身体里面也不是每个细胞都一样的。比如，产生不同抗体的B细胞，每个人就有成千上万种，也就是有成千上万个不同的序列。2. 测序的过程。你说的不同当然是存在的，不过对于编码序列来说，编码功能蛋白的序列都是一样的，不然就是基因突变...
